销售胰岛素ELISA试剂盒实验原理
产品简介
详细信息
人胰岛素受体底物1(IRS1) ELISA 试剂盒
实验原理
1. 抗体或抗原的吸附:将待测抗原或抗体吸附到固相载体上,常用的载体有微孔板、玻璃纤维、聚苯乙烯等。这些载体表面具有特殊的化学基团,能够与待测抗原或抗体特异性结合。
2. 酶标记的抗体或抗原的结合:将酶标记的抗体或抗原与待测抗原或抗体结合,形成酶标记的抗原-抗体复合物。酶标记的抗体或抗原具有高度的特异性和亲和力,能够与待测抗原或抗体形成稳定的复合物。
3. 底物显色反应:当酶标记的抗原-抗体复合物与底物溶液接触时,酶能够催化底物分解,产生颜色变化。通过测量颜色的变化程度,可以判断待测抗原或抗体的浓度。
试剂盒性能
1. 检测范围:1.95 nmol/L –100 nmol/L。
2. 灵敏度:检测浓度小于0.78 nmol/L。
3. 特异性:不与其它可溶性结构类似物交叉反应。
4. 重复性:板内变异系数小于10% ,板间变异系数小于15%。
试剂盒组成
名称 | 96 孔配置 | 48 孔配置 | 备注 |
微孔酶标板 | 12 孔×8 条 | 12 孔×4 条 | 无 |
标准品 | 0.5mL | 0.5mL | 按说明书进行稀释 |
标准品稀释液 | 6mL | 3mL | 按说明书进行稀释 |
样本xishi液 | 6mL | 3mL | 按说明书进行稀释 |
检测抗体-HRP | 6mL | 3mL | 无 |
20×洗涤缓冲液 | 20mL | 20mL | 按说明书进行稀释 |
底物 A | 6mL | 3mL | 无 |
底物 B | 6mL | 3mL | 无 |
终止液 | 6mL | 3mL | 无 |
封板膜 | 2 张 | 2 张 | 无 |
说明书 | 1 份 | 1 份 | 无 |
自封袋 | 1 个 | 1 个 | 无 |
操作步骤
1. 样品采集与处理
(1)血清:收集血液后,室温放置30分钟左右,待血液凝固后离心分离血清。
(2)血浆:收集血液后,加入适量抗凝剂(如EDTA),离心分离血浆。
(3)细胞培养上清液:收集细胞培养液,离心去除细胞残骸,收集上清液。
2. 样品稀释
根据需要,将血清、血浆或细胞培养上清液进行适当稀释。
3. 加样与温育
(1)将稀释后的样品加入已包被兔生长抑su抗体的酶标板孔中,每孔加入100μL。
(2)加入适量酶标二抗,每孔加入100μL。
(3)将酶标板放入37℃恒温箱中温育30分钟。
4. 洗板与显色
(1)取出酶标板,用洗涤液洗3次,每次5分钟。
(2)加入底物液,每孔加入100μL,放入37℃恒温箱中温育15分钟。
(3)加入终止液,每孔加入50μL,混匀。
5. 测定与结果计算
(1)用酶标仪检测各孔的光密度值(OD值),波长为450nm。
(2)根据标准品浓度与OD值的对应关系,计算出样品中兔生长抑su浓度。
人胰岛素受体底物1(IRS1) ELISA 试剂盒结果分析
根据标准品和样本的OD值,绘制标准曲线,从而计算出样本中角蛋白1(KRT1)的浓度。具体分析方法可参考试剂盒说明书或相关文献。
注意事项
A 仔细阅读说明书。
B 检查试剂盒标签上的有效期。如果超过有效期,请勿使用。
C 按说明书确定所有试剂齐全(数量、体积)。
D 标本制备要规范,每份标本体积要按2-3个复孔以上的量制备(贮存),尽量分装做备份。短期内无法实验者,注意低温保存。
E 准备好所有实验额外所需物品,(比如移液器,试管,清洗器,酶标仪)。
F 按说明书将所用试剂平衡至室温,根据检测标本数量确定所需试剂的量。
G 检查试剂盒内每种试剂的贮存条件,所有试剂均按照试剂盒内说明书推荐的条件存储。
H 检查不稳定或者变质的试剂溶液(比如沉淀或变色)。有些试剂,比如标准品稀释液或者检测稀释液,可能在设计时就含有沉淀物。所有试剂在滴入酶标板之,必需充分混匀。而由于沉淀物的特性,在加入酶标板之,必需不停搅拌。
I 充分的孵育时间和温度。
J 切勿使用不同生产批号的试剂取代现有试剂或混合现有试剂。
K 在混合或溶解蛋白溶液时,避免泡沫产生。
L 在实验开始之,安排好实验流程。
M 在实验开始之,清洁工作台。
N 若有问题,应与我公司或代理商的技术支持联系。
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