ATP荧光检测仪检测原理 常用ATP荧光检测仪有3M LM1荧光检测仪 海净纳PLUS V2荧光检测仪 龟甲万PD-30荧光检测仪 纽勤ATP荧光检测仪9902 海净纳ensure大肠杆菌荧光检测仪 国产ATP荧光检测仪等都是采用以下原理
能催化荧光素氧化并产生生物光的一类酶被称为荧光素酶（Luciferase）。

荧光素酶的种类很多，其中包括：虫荧光素酶，细菌荧光素酶，其他荧光素酶等，

现在研究和应用多的是萤火虫荧光素酶，比如北美萤火虫荧光素酶、日本萤火

虫荧光素酶、欧洲萤火虫荧光素酶、北京萤火虫荧光素酶等。目前，萤火虫荧光

素酶的发光体系的研究主要是来自北美萤火虫，而国内生产的荧光素酶大部分也

是通过克隆北美荧光素酶基因方法获取的。虽然各种荧光素酶结构不同，但其差

别不大，具有同源性。其中以北美萤火虫荧光素酶为例对其基本特征进行描述：

北美萤火虫荧光素酶是由单一多肽链组成的，含 551 个氨基酸，不含辅助因子

并且大部分氨基酸是非极性氨基酸，分子量约 62kD，等电点是 6.24，在空间结

构中含有两对二硫键，并且有两个 Trp，它的大吸收值为 562nm。具体蛋白

结构见下图：

3萤火虫荧光素酶催化发光是在 ATP、荧光素和 Mg2+存在下发出黄绿色荧

光的。一般的多数科学家认为荧光素酶作为催化剂催化的是 D-荧光素，D-荧光

素氧化发光而且在一定条件下荧光的发射强度直接与 ATP 的浓度呈正相关。其

化学反应方程式为：

Luciferin+ATP+O2＝Oxyluciferin+AMP+PPi+CO2+Light

反应过程先是荧光素酶与荧光素结合，然后借高能化合物 ATP 提供的能量，

形成具有高活性的复合物，此复合物与氧气反应形成过氧化物后，裂解而形成激

发态物质。荧光素的（LH2）活性中心首先与荧光素酶结合形成 E-LH2。然后再

与 ATP 作用产生焦磷酸，后发出荧光：

形成的过氧化物可能是二氧丁环酮，其裂解反应生成激发态产物氧化荧光

素，激发态的氧化荧光素发射光子回到基态。这一反应简化为：

42

E-LH +ATP-Mg +O P(L=O)+E-AMP+CO +PPi+h 2 2 2 υ





具体的化学反应过程如下
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