人胰岛素受体底物1(IRS1) ELISA 试剂盒

实验原理

1. 抗体或抗原的吸附：将待测抗原或抗体吸附到固相载体上，常用的载体有微孔板、玻璃纤维、聚苯乙烯等。这些载体表面具有特殊的化学基团，能够与待测抗原或抗体特异性结合。

2. 酶标记的抗体或抗原的结合：将酶标记的抗体或抗原与待测抗原或抗体结合，形成酶标记的抗原-抗体复合物。酶标记的抗体或抗原具有高度的特异性和亲和力，能够与待测抗原或抗体形成稳定的复合物。

3. 底物显色反应：当酶标记的抗原-抗体复合物与底物溶液接触时，酶能够催化底物分解，产生颜色变化。通过测量颜色的变化程度，可以判断待测抗原或抗体的浓度。

试剂盒性能

1. 检测范围：1.95 nmol/L –100 nmol/L。

2. 灵敏度：检测浓度小于0.78 nmol/L。

3. 特异性：不与其它可溶性结构类似物交叉反应。

4. 重复性：板内变异系数小于10% ，板间变异系数小于15%。

试剂盒组成

操作步骤

1. 样品采集与处理

（1）血清：收集血液后，室温放置30分钟左右，待血液凝固后离心分离血清。

（2）血浆：收集血液后，加入适量抗凝剂（如EDTA），离心分离血浆。

（3）细胞培养上清液：收集细胞培养液，离心去除细胞残骸，收集上清液。

2. 样品稀释

根据需要，将血清、血浆或细胞培养上清液进行适当稀释。

3. 加样与温育

（1）将稀释后的样品加入已包被兔生长抑su抗体的酶标板孔中，每孔加入100μL。

（2）加入适量酶标二抗，每孔加入100μL。

（3）将酶标板放入37℃恒温箱中温育30分钟。

4. 洗板与显色

（1）取出酶标板，用洗涤液洗3次，每次5分钟。

（2）加入底物液，每孔加入100μL，放入37℃恒温箱中温育15分钟。

（3）加入终止液，每孔加入50μL，混匀。

5. 测定与结果计算

（1）用酶标仪检测各孔的光密度值（OD值），波长为450nm。

（2）根据标准品浓度与OD值的对应关系，计算出样品中兔生长抑su浓度。

人胰岛素受体底物1(IRS1) ELISA 试剂盒结果分析

根据标准品和样本的OD值，绘制标准曲线，从而计算出样本中角蛋白1（KRT1）的浓度。具体分析方法可参考试剂盒说明书或相关文献。

注意事项

A 仔细阅读说明书。

B 检查试剂盒标签上的有效期。如果超过有效期，请勿使用。

C 按说明书确定所有试剂齐全（数量、体积）。

D 标本制备要规范，每份标本体积要按2-3个复孔以上的量制备（贮存），尽量分装做备份。短期内无法实验者，注意低温保存。

E 准备好所有实验额外所需物品，（比如移液器，试管，清洗器，酶标仪）。

F 按说明书将所用试剂平衡至室温，根据检测标本数量确定所需试剂的量。

G 检查试剂盒内每种试剂的贮存条件，所有试剂均按照试剂盒内说明书推荐的条件存储。

H 检查不稳定或者变质的试剂溶液（比如沉淀或变色）。有些试剂，比如标准品稀释液或者检测稀释液，可能在设计时就含有沉淀物。所有试剂在滴入酶标板之，必需充分混匀。而由于沉淀物的特性，在加入酶标板之，必需不停搅拌。

I 充分的孵育时间和温度。

J 切勿使用不同生产批号的试剂取代现有试剂或混合现有试剂。

K 在混合或溶解蛋白溶液时，避免泡沫产生。

L 在实验开始之，安排好实验流程。

M 在实验开始之，清洁工作台。

N 若有问题，应与我公司或代理商的技术支持联系。

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